一本一道AV无码中文字幕﹣百度,午夜爽喷水无码成人18禁三级,东北粗口国产床,人妻另类 专区 欧美 制服

免費(fèi)咨詢熱線:
15522676233
技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)中心 > 影響熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的因素有哪些?

影響熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的因素有哪些?

 更新時(shí)間:2023-10-08 點(diǎn)擊量:628

熒光原位雜交是一門新興的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù),是 20 世紀(jì) 80 年代末期在原有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術(shù)。那么影響熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的因素有哪些呢?讓我們一起來看看吧!

一、固定液的選擇及固定時(shí)間

①石蠟組織建議用10%中性緩沖福爾馬林固定12~48h,其它固定液對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能產(chǎn)生一定的影響。

②組織標(biāo)本離體后應(yīng)盡快固定,較大標(biāo)本切開固定。如樣本固定不及時(shí),熒光信號(hào)會(huì)減弱。(尤其環(huán)境溫度較高時(shí)更應(yīng)及時(shí)固定)

③固定液體積應(yīng)不少于標(biāo)本體積的10倍,否則固定不充分,容易出現(xiàn)無信號(hào)或者信號(hào)很弱的現(xiàn)象。

④為了保證信號(hào)的準(zhǔn)確性,蠟塊最好在2年內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),已經(jīng)切好的切片在6周內(nèi)檢測(cè)最佳。

二、組織切片和載玻片的選擇

組織切片4~5μm厚,過厚或過薄的切片均會(huì)對(duì)信號(hào)的強(qiáng)弱產(chǎn)生影響,切片過厚將導(dǎo)致雜交不充分,最終信號(hào)點(diǎn)發(fā)生重疊,影響計(jì)數(shù)。而且切片應(yīng)完整,質(zhì)量良好,否則會(huì)在預(yù)處理時(shí)掉片。

載玻片的選擇建議使用防脫載玻片,有條件的實(shí)驗(yàn)室可使用更好的陽(yáng)離子或者陰離子專用載玻片,可有效防止脫片現(xiàn)象的發(fā)生。

三、切片的預(yù)處理

切片預(yù)處理過程包括煮沸處理和蛋白酶消化。

①當(dāng)組織處理不規(guī)范、切片過厚或烤片不足時(shí),在煮沸過程中容易掉片,建議烤片溫度在56℃過夜。煮沸過程中要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)溫度和時(shí)間。

②酶消化是FISH實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟之一,如果對(duì)組織不熟悉,可以先消化推薦的反應(yīng)時(shí)間,然后復(fù)染DAPI在熒光顯微鏡下觀察,在DAPI通道下,以細(xì)胞既無空洞(消化過度),亦無明顯的云霧狀(消化不足)為最佳,同時(shí)可切換觀察紅綠通道,以紅綠通道無明顯的背景為佳,如果背景較高,可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。

③對(duì)于陳舊的石蠟組織切片,要適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間,否則會(huì)出現(xiàn)大量的自發(fā)熒光。

四、變性和雜交

變性和雜交是本實(shí)驗(yàn)最關(guān)鍵的步驟,變性的時(shí)間和溫度是雜交成功是否的關(guān)鍵,變性和退火溫度對(duì)熒光信號(hào)影響較大,變性和退火溫度過低會(huì)導(dǎo)致雜交效率變低,使熒光信號(hào)變?nèi)?,變性和退火溫度過高易出現(xiàn)高背景。

為保證變性期間溫度的穩(wěn)定,建議采用專業(yè)的原位雜交儀進(jìn)行變性和雜交步驟,不僅能夠減少實(shí)驗(yàn)的繁瑣性,而且更有利于實(shí)驗(yàn)條件的控制,比如時(shí)間、溫度和避光條件等。

為避免雜交液在變性和雜交過程中的損失和防止干片,一定要在蓋玻片的四周用橡膠水泥進(jìn)行密封。

更多有關(guān)熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的影響因素,請(qǐng)聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:


久久变态刺激另类SM按摩| 男人J桶进女人P无遮挡在线观看| 婷婷精品国产亚洲AV麻豆不片| 国产农村妇女作爱视频播放| 又粗又长又色又爽免费视频| 特黄特色大片免费播放器下载| 天美传媒年轻的母亲| 别揉我奶头~嗯~啊~动漫网站| 成人无遮挡18禁免费视频| 国产成人无码AV在线播放DVD | 我把我的肥岳日出水来73| 国产SUV精二区| CHINESE性老妇老女人| 间谍过家家第二季在线观看免费| 50岁人妻丰满熟妇ΑV无码区| 未满小14洗澡无码视频网站 | 奶头被教练摸得受不了| 小浪货腿打开水真多真紧| 在厨房拨开内裤进入毛片| 色偷偷AV老熟女| 韩国三级大胸的小峓子2| 人人妻人人爽人人做夜欢视频| 扒开老师大腿猛进AAA片| 欧美男同GAY做受GAY网站| 肥大BBWBBW高潮喷水| 日日噜噜夜夜狠狠VA视频| 天天狠天天透天干天天怕∴| 一进去一爽又粗又大| 亚洲色婷婷久久精品AV蜜桃| 少妇一夜十三次精尽人亡| 好男人视频在线观看免费完整版| 内衣柜办公室L~3带樱花| 夜夜躁狠狠躁日日躁视频| 男女裸体做爰爽爽全过程| 巨胸喷奶水视频WWW网站| 久久AV无码乱码A片无码| 无码人妻精品一区二区蜜桃| 三上悠亚SSⅠN939无码播放| 淑芬又痒了把腿张开在线视频| 末成年女AV片一区二区丫| 免费无码毛片一区二区APP |